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Los ciliados, un grupo de eucariotas ciliados unicelulares, han descrito más de 10.000 especies desde los albores del microscopio óptico. Los cilios son una característica importante de los ciliados y contribuyen a su diversidad. Varían en longitud, cubren la superficie celular o partes específicas, o pueden agruparse para formar cirros. La tinción de los cilios y los cuerpos basales es un método común en la investigación de la morfología de los ciliados, utilizando técnicas como la impregnación con plata y la tinción por inmunofluorescencia con anticuerpos asociados con la tubulina.
Los colorantes de tubulina de células vivas, comúnmente utilizados en células humanas, requieren reactivos de permeabilización celular para ingresar a las células. Sin embargo, estos reactivos son ineficaces en los ciliados. En las células ciliadas, los tintes suelen ser ingeridos por fagocitosis y terminan en orgánulos rodeados de membranas, lo que plantea un desafío en la administración de tintes.
En un estudio publicado en la revista Biología y seguridad acuáticasUn equipo de investigadores chinos ha desarrollado un método directo y adaptable para la tinción de tubulina/cilias que ofrece excelentes resultados en ciliados.
«Nuestro enfoque, que implica el uso de tintes de tubulina de células vivas para teñir células ciliadas fijas, presenta una opción más eficiente y práctica para la investigación de ciliados», dice el autor principal, Tingting Pan. «Además, permite una integración perfecta de la tinción de inmunofluorescencia con anticuerpos cuando sea necesario».
Este nuevo método de tinción con tubulina ofrece cuatro ventajas importantes a la comunidad de investigación de ciliados.
- Los citoesqueletos de tubulina prevalecen en estos organismos y esto ha estimulado los estudios de biología celular en ciliados, particularmente la investigación sobre citoesqueletos.
- Esto simplifica el proceso de tinción, beneficia los estudios morfológicos y taxonómicos y lo hace accesible a la mayoría de los laboratorios de taxonomía de ciliados.
- Cuando se combina con la microscopía confocal, el método permite la exploración detallada de los patrones basales del cuerpo (características taxonómicas cruciales) utilizando sólo unas pocas células y evitando las complejidades de los métodos tradicionales de impregnación con plata.
- Los estudios ecológicos de ciliados se benefician de este enfoque.
«La flexibilidad del método permite la tinción de poblaciones celulares mixtas de ambientes acuáticos, seguida del enriquecimiento utilizando una red de plancton», añade Pan. «A medida que avanzan las imágenes de fluorescencia de alto rendimiento, nuestro método de tinción se puede integrar perfectamente con sistemas de clasificación basados en aprendizaje automático debido a su capacidad para producir imágenes con un fondo claro».
Más información:
Tingting Pan et al., Un método mejorado para la tinción con tubulina de eucariotas ciliados, Biología y seguridad acuáticas (2024) DOI: 10.1016/j.watbs.2024.100274
Proporcionado por KAI Communications Co.
referencia: El estudio de eucariotas ciliados produce un método simple y versátil para la tinción con tubulina (22 de julio de 2024) Consultado el 22 de julio de 2024 en https://phys.org/news/2024-07-ciliated-eukaryotes-simple-versatile-method.html
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